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蛋白手性柱

簡要描述:蛋白手性柱:蛋白質(zhì)型手性色譜柱屬于第5種類型。分離依賴于疏水相互作用和極性相互作用。已經(jīng)有多種蛋白質(zhì)用于此類手性色譜柱。目前使用較多的是α-酸性糖蛋白(α-Acid Glycoprotein,AGP),人血清白蛋白(Human Serum Albumin,HSA),牛血清白蛋白(Bovine Serum Albumin,BSA)和卵類粘蛋白(Ovomucoid,OV)。

  • 產(chǎn)品型號(hào):
  • 廠商性質(zhì):生產(chǎn)廠家
  • 更新時(shí)間:2024-08-07
  • 訪  問  量:2455

詳細(xì)介紹

 

蛋白手性柱

 
  α-酸性糖蛋白分子由181個(gè)氨基酸殘基和40個(gè)唾液酸(sialic acid)殘基構(gòu)成。α-酸性糖蛋白分子偏酸性,等電點(diǎn)為2.7。含有兩個(gè)二硫鍵,性質(zhì)很穩(wěn)定。α-酸性糖蛋白分子可以共價(jià)鍵合到硅膠上,制成手性色譜柱,可以分離許多化合物。
  α-酸性糖蛋白手性色譜柱使用的流動(dòng)相通常為pH 4-7的磷酸鹽緩沖液和很小比例的有機(jī)相。有機(jī)相*異丙醇,如達(dá)不到分離要求,可以嘗試乙腈,乙醇,甲醇或四氫呋喃。有機(jī)相的改變導(dǎo)致蛋白結(jié)構(gòu)發(fā)生暫時(shí)的改變。色譜柱的負(fù)載量至關(guān)重要,典型的負(fù)載量為0.02mg/ml的濃度樣品,進(jìn)樣20μl。pH 的改變對(duì)手性選擇性起關(guān)鍵作用,尤其是胺類化合物。pH降低導(dǎo)致蛋白質(zhì)負(fù)電荷的降低,引起胺類化合物保留時(shí)間減小,然而這意味著可以減小有機(jī)相比例,使選擇性增加,峰形改善。
  通過調(diào)節(jié)有機(jī)相比例仍無法達(dá)到分離效果時(shí),有時(shí)需用電荷調(diào)節(jié)劑。但這可能引起蛋白結(jié)構(gòu)的*改變,這些電荷調(diào)節(jié)劑包括丁酸、辛酸、癸酸和二甲基辛胺。有時(shí)也用到1,2 亞乙基二醇,1,2丁醇和氯化鈉。溫度對(duì)分離也有影響,溫度增加保留時(shí)間,減小分離因子。
  人血清白蛋白(HSA)分子量為69,000,等電點(diǎn)為4.8。蛋白中認(rèn)為存在兩個(gè)藥物結(jié)合位點(diǎn):華法令-氮雜普魯帕宗(warfarin-azapropazone)和苯基二氮雜-吲哚(benzodiazapine-indole)結(jié)合位點(diǎn)。流動(dòng)相中加入辛酸,采用人血清白蛋白手性色譜柱可以有效分離benzodiazapine。Warfarin 和oxazepam也用人血清白蛋白手性色譜柱得到了分離,流動(dòng)相組成為:100mM磷酸緩沖液pH7:乙腈:異丙醇 = 84:10:6。
  牛血清白蛋白(BSA)為球型蛋白,分子量為66,000,等電點(diǎn)為4.7。此蛋白為一個(gè)單氨基酸鏈,通過17個(gè)二硫鍵形成9個(gè)雙環(huán)。許多化合物通過牛血清白蛋白手性色譜柱得到分離。牛血清白蛋白不如α-酸性糖蛋白穩(wěn)定,一些有機(jī)溶劑(如乙腈、甲醇)可使蛋白變性,因此使用起來要特別注意。
  卵類粘蛋白由蛋清中提取,分子量為55,000。它可分離大量的胺類和酸類化合物。
  蛋白手性色譜柱的載樣量均較小。影響了蛋白手性色譜柱在制備色譜中的應(yīng)用。
  蛋白手性色譜柱在所有手性色譜柱中是應(yīng)用zui廣的色譜柱,但并不是效果的色譜柱。

蛋白質(zhì)鍵合手性柱描述產(chǎn)品描述

規(guī)格

貨號(hào)

Reprosil Chiral-AGP(α1-酸性糖蛋白手性柱),

粒徑5μm,USP L41填料,反相系統(tǒng)

 

 

 

 

 

具有zui廣泛的適用范圍:

1:胺類化合物(一級(jí)胺,二級(jí)胺,三級(jí)胺,四級(jí)胺類化合物)

2:酸性化合物(強(qiáng)酸性化合物,弱酸性化合物)

3:非質(zhì)子類化合物(酰胺類化合物,酯類化合物,醇類化合物,亞砜類化合物等)

4;例如纈沙坦原料檢測(cè)

 

150 x 4mm

r35.agp.s1504

100 x 4mm

r35.agp.s1004

150x3mm

r35.agp.s1503

100 x 3mm

r35.agp.s1003

50 x3 mm

r35.agp.s0503

Guards(5 x 3 mm, 2 pieces

r35.agp.v0003

Guard holder(direct )

PN:81.00

150x2mm

r35.agp.s1502

100 x 2mm

r35.agp.s1002

50 x2 mm

r35.agp.s0502

Guards(5 x 2 mm, 2 pieces)

r35.agp.v0002

Guard holder(direct )

PN:91.00

Reprosil Chiral-HSA人體血清白),粒徑5μm,USP L79填料,反相系統(tǒng)

 

硅膠表面共價(jià)鍵合有人體血清白蛋白適用于反相系統(tǒng)。

適用分離的化合物:強(qiáng)酸、弱酸、兩性離子和非質(zhì)子類化合物

150x2mm

r35.hsa.s1502

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r35.hsa.s1002

50 x2 mm

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Guards(5 x 2 mm, 2 pieces)

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Guard holder(direct )

PN:91.00

 

 

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