層析柱是凝膠層析技術(shù)中的主體,一般用玻璃管或有機(jī)玻璃管。層析柱的直徑大小不影響分離度,樣品用量大,可加大柱的直徑,一般制備用凝膠柱,直徑大于2厘米,但在加樣時(shí)應(yīng)將樣品均勻分布于凝膠柱床面上。此外, 直徑加大,洗脫液體體積增大,樣品稀釋度大。常見(jiàn)的有玻璃層析柱和加壓層析柱。
玻璃層析柱,開(kāi)口大,加料快,不需要其他儀器的配合,上方可以做成標(biāo)準(zhǔn)口與其他的標(biāo)口玻璃儀器相接,但有不容易測(cè)量,篩網(wǎng)下方容易殘留很多液體,層析速度較慢,不準(zhǔn)確的特點(diǎn),一般用于對(duì)精度要求沒(méi)有那么高的實(shí)驗(yàn),
加壓層析柱,兩端一般使用4F材料,耐腐蝕,酸堿性的耐度也可以,中段有玻璃材料的,也有有機(jī)玻璃材料的,需要與蠕動(dòng)泵相結(jié)合,加快層析速度,用泵將料打進(jìn),如果沒(méi)有泵則使用比較麻煩?,F(xiàn)在一般的實(shí)驗(yàn)室都是使用加壓的層析柱,淘寶上有賣(mài)的。
層析柱和色譜柱沒(méi)有區(qū)別,有顏色的譜帶叫作色譜,確切的應(yīng)叫層析柱,因?yàn)楝F(xiàn)在色帶是沒(méi)有顏色的,但都習(xí)慣叫色譜柱。
層析柱和色譜柱真真要說(shuō)區(qū)別那還是有一點(diǎn)區(qū)別,那就是色譜柱只是用在色譜儀中,層析柱不一定是用在色譜儀中,比如:用溶劑洗脫的柱層析所用的層析柱就不叫色譜柱。
層析柱與液相柱的區(qū)別:
1、壓力
液相色譜柱(尤其是分析性液相色譜):壓力較高,一般為10-20Mpa
層析柱:一般為常壓,或使用真空泵(0.1Mpa左右)
2、填料
液相色譜柱:粒徑較小(常規(guī)5-20um)
層析柱:粒徑較大
3、分離度
由第二項(xiàng)決定,粒徑越小,單位長(zhǎng)度下理論塔板數(shù)越高
液相色譜柱:分離度比層析柱好
4、效率
液相色譜柱:分離速度快,一般在一小時(shí)內(nèi)
層析柱:分離時(shí)間長(zhǎng),一小時(shí)以上
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